In vitro efficacy of two commercial products of Metarhizium anisopliae s.l. for controlling the cattle tick Rhipicephalus microplus / Eficácia in vitro de dois produtos comerciais de Metarhizium anisopliae s.l. no controle do carrapato bovino Rhipicephalus microplus

Abstract The effects of two different products - Metarril® SP Organic (dry conidia) and Metarril® SC Organic (emulsifiable concentrated conidia in vegetable oil) - on eggs, larvae and Rhipicephalus microplus engorged females were here explored. Three concentrations (108, 107, and 106 conidia mL-1) for both products were prepared in water + 0.1% Tween® 80 (v/v); afterward, bioassays were carried out for all R. microplus stages by immersion in suspensions (Metarril® SP) or formulations (Metarril® SC). Metarril® SP suspensions showed low efficacy and did not affect biological parameters of treated engorged females; for eggs and larvae, only slight decreases in hatchability and larvae population were observed. Despite a delay in germination, Metarril® SC presented better results; for females, reductions in Egg Mass Weight (EMW) and Egg Production Index (EPI) were reported. On eggs, 108 conidia mL-1 increased Incubation Period (IP), shortened Hatching Period (HP) and decreased hatchability by up to 61%; for larvae, 107 and 108 conidia mL-1 reached 99.6 and 100% larval mortality respectively, 10 days after fungal exposure. Thus, further studies involving the use of oil-based formulations for ticks such as Metarril® SC need to be performed, especially to control the most susceptible stages (eggs and larvae).

Resumo No presente trabalho, os efeitos de dois diferentes produtos foram avaliados - Metarril® SP Organic (conídios secos) e Metarril® SC Organic (conídios concentrados em óleo vegetal) - para ovos, larvas e fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus. Três concentrações (108, 107 e 106 conídios mL-1) para cada produto foram preparadas em água + Tween® 80 0,1% (v/v); os bioensaios foram realizados para todos os estágios de R. microplus por imersão nas suspensões (Metarril® SP) ou formulações (Metarril® SC). Metarril® SP não afetou os parâmetros biológicos das fêmeas, demonstrando assim baixa eficácia; para ovos e larvas, foram observadas discretas diminuições na eclodibilidade e na população de larvas. Apesar de um atraso na germinação, Metarril® SC apresentou melhores resultados; para as fêmeas, foram detectadas reduções no Peso da Massa de Ovos (PMO) e no Índice de Produção de Ovos (IPO). Para os ovos, a concentração de 108 conídios mL-1 aumentou o Período de Incubação (PI), reduziu o Período de Eclosão (PE) e também o da eclodibilidade em até 61%; para larvas, 107 e 108 conídios mL-1 atingiram 99,6 e 100% de mortalidade larval, respectivamente, 10 dias após a exposição fúngica. Com isso, estudos adicionais que envolvem o uso de formulações à base de óleo para carrapatos, como Metarril® SC, precisam ser realizados, especialmente para controlar os estágios mais suscetíveis (ovos e larvas).

Effects of different formulations on viability and medium-term storage of Metarhizium anisopliae conidia / Efeitos de diferentes formulações na viabilidade e no armazenamento de conídios de Metarhizium anisopliae a médio prazo

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de diferentes formulações na viabilidade de conídios de Metarhizium anisopliae. No experimento 1, a viabilidade de conídios misturados com oito óleos adjuvantes emulsionáveis (OAE), sete espalhantes adesivos, três óleos vegetais e quatro óleos minerais foi avaliada 24h e 48h depois de espalhados sobre o meio de SDA. Formulações que não apresentaram nenhum efeito adverso sobre a viabilidade dos conídios foram utilizadas no experimento sobre armazenamento. No experimento 2, avaliaram-se os efeitos do armazenamento a 10°C e 27°C durante 40 semanas de conídios de M. anisopliae var. acridum formulados em cinco OAE, em um óleo vegetal e em uma mistura de dois óleos minerais, além de conídios puros e secos. No experimento 1, as formulações em óleo não causaram nenhum efeito negativo na germinação dos conídios. Os tratamentos com os óleos adjuvantes Actipron®, Ashlade® e Codacide® proporcionaram níveis de germinação semelhantes aos obtidos com óleos minerais e vegetais, 24h após a incubação. O espalhante Ethoken® C12 foi letal para os conídios. No experimento 2, a viabilidade conidial de uma mesma formulação declinou com o passar do tempo. A viabilidade foi mantida acima de 90% a 10°C em todas os formulantes testados. A formulação com Ashlade® (OAE) proporcionou níveis de germinação semelhantes aos obtidos com a mistura Shellsol e Ondina, a 10°C e 27°C durante 40 semanas. Logo, OAE podem ser usados para formular conídios de M. anisopliae sem nenhum efeito adverso na viabilidade dos mesmos.

The aim of this work was to evaluate the effects of different formulations on the viability of Metarhizium anisopliae conidia. In a first experiment, the viability of conidia mixed with eight emulsifiable adjuvant oils (EAO), seven wetter/spreaders, three vegetable oils and four mineral oils was evaluated 24h and 48h after spreading over SDA medium surface. Some formulations, which did not present any adverse effect on conidial viability in the first 24h of incubation, were recommended for the medium-term storage experiment. In a second experiment, the effects of different formulations on medium-term storage (40 weeks) of M. anisopliae var. acridum conidia were evaluated at 10°C and 27°C. Five EAO, one vegetable oil, a mixture of mineral oils and pure dry conidia were tested. In the experiment 1, the oil formulations did not cause any negative effect on conidial germination. The treatments with the adjuvant oils Actipron®, Ashlade® and Codacide® gave germination levels equal to mineral and vegetable oils after 24h of incubation. The wetter/spreader Ethoken® C12 was lethal to conidia. All tested emulsifiable adjuvant oil-based formulations were compatible to the conidia as the oil-based formulations after 48h of incubation. In the experiment 2, conidial viability within the same formulation declined over time. Conidial viability was maintained above 90% at 10°C in all tested formulants. The conidial suspension with Ashlade® gave equal germination levels to Shellsol plus Ondina, when stored at 10°C and 27°C for 40 weeks. Thus EAO can be used to formulate M. anisopliae conidia without adverse effects on viability.